光散射與(yu) 細胞化學技術聯合應用於(yu) 白細胞分類計數：聯合應用激光射的過氧化物酶染色技術來進行白細胞分類計數。嗜酸性粒細胞有很強的過氧化物酶活性，中性粒細胞有較強的過氧化物酶活性，單細胞資助之，而淋巴細胞和嗜堿性粒細胞均無此酶。

將血興(xing) 高采烈經過氧化物酶染色後，胞質內(nei) 即可出現不同的酶化學反應，由此構成了此種血液分析儀(yi) 的分析基礎，化妝品的分血器將血加入到含有清洗劑和甲醛的高滲液體(ti) 內(nei) （21倍稀釋）並孵育（400～700）20秒鍾。其中清洗劑（含有非離子表麵活性劑）使細胞破壞，甲醛使白細胞質內(nei) 酶被固定，此後發生第二步反應，即加入過氧化氫和4氯=蔡酚，並加熱13秒，此時如果待測細胞質中含有過氧化酶即可分解H2O2產(chan) 生[O]，後者可使4氯-蔡酚顯色並沉積定位於(yu) 酶反應部位，此類細胞通過測試區時，由於(yu) 酶反應強度不同（陰性、弱陽性、強陽性）和細胞體(ti) 大小不同，激光束射互細胞上的前向角和散射角有所不同，以X軸為(wei) 吸光率標記（酶反應強度），Y軸為(wei) 光散射（細胞大小）。每個(ge) 細胞產(chan) 生的兩(liang) 個(ge) 信號結合定位在細胞圖上（圖2-18）。每秒鍾儀(yi) 器可測上千個(ge) 細胞。計算機係統對存儲(chu) 的資料進行分析處理，並結合嗜好堿性粒細胞或分葉核粒細胞通道結果計算出白細胞總參數和分類良數。

圖2-18 激光與(yu) 細胞化學聯合檢測白細胞直方示意圖

4．多角度偏振光散射白細胞分類技術（multi — Angle polatised scatter separation of white cell,MAPSS）其原理是一定體(ti) 積的全血標本用鞘流液按適當比例稀釋。其白細胞內(nei) 部結構近似於(yu) 自然狀態，因嗜堿性粒細胞嘌粒具有吸濕的特性，所以嗜堿性粒細胞的結構有輕微改變。紅細胞內(nei) 部的滲透透壓高於(yu) 鞘興(xing) 高采烈的滲透壓而發生改變，紅細胞內(nei) 的血紅蛋白從(cong) 細胞內(nei) 遊離出來，而鞘液內(nei) 的水分進入紅細胞中，細胞膜的結構仍然完整，但此時的紅細胞折炮指數與(yu) 鞘液的相同，故紅細胞不幹擾白細胞檢測。

在水動力係統的作用下，樣本被集中為(wei) 一個(ge) 直徑為(wei) 30μm的小股液流，該液流將稀釋細胞單個(ge) 排列，因是單個(ge) 通過激光束，故在各個(ge) 方向都有其散射光。可以從(cong) 四個(ge) 角度測定散射光的密度（見圖2-19）：①00：前角光散射（10～30）粗略地測定細胞大小；②100：狹角光散射（70～110）測細胞結構及其複雜性的相對特征；③900：900消偏振光散射（700`～1100），基於(yu) 顆粒可以將垂直角度的偏振激光消偏振的特性，將嗜酸細胞從(cong) 中性粒細胞和其它細胞中分離出來。④900：垂直光散射（700～1100）主要對細胞內(nei) 部顆粒和細胞成分進行測量。可以從(cong) 這四個(ge) 角度同時對個(ge) 白細胞進行測量，同一種特定的程序自動儲(chu) 存和分析數據，將白細胞分為(wei) 嗜酸性粒細胞、中性粒細胞、嗜堿性粒細胞、淋巴細胞和單核細胞5種。

圖2-19 MAPSS測量原理