非線性成像技術是一種行之有效的工具,其通過提供獨特的數據來幫助生物學家將特定的分子活動與(yu) 細胞乃至整個(ge) 生物體(ti) 的功能和結構緊密聯係起來。目前有兩(liang) 大主要發展趨勢影響著可調諧超快激光器的設計,以實現在衍射極限或近衍射極限情況下的非線性顯微成像:第一是需要更長的波長來實現更深度的成像和更少的光損傷(shang) ;第二是使用更加靈活的係統來支持多模式成像。同時,係統靈活性不但能減少實驗的建立時間,而且還能令激光器的價(jia) 值最大化。
更寬的調諧範圍和更長的激發波長
非線性成像能夠受益於(yu) 超快激光光源更寬的調諧範圍,尤其是在長波長區域。更寬的調諧範圍能夠支持熒光體(ti) -染料、指示劑和熒光蛋白的樣品需求,這些樣品在尖端生物學領域的應用不斷增加。此外,對於(yu) 二次諧波和三次諧波成像而言,更寬的調諧範圍能夠使這些成像技術工作在一個(ge) 更加合適的波段,而這一波段正好能夠與(yu) 其他實驗參數和限製相匹配。最為(wei) 重要的是,擴展超快顯微鏡激光器的調諧範圍到更長波長,使得對更深層次組織的成像成為(wei) 可能(見圖1)。

圖1:更長的波長實現更深層次的組織成像。圖中小鼠腦部毛細血管的MPE照片,是利用AlexaFluor568和相幹公司的ChameleonVisionII激光器實現的雙光子激發成像。
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