顯微鏡的正確調試和使用 
 
　　在了解了顯微鏡各主要部件的名稱、構造和功能之後，為(wei) 了更好地發揮顯微鏡的各種功能，提高工作效率，保證在顯微觀察及顯微照像過程中取得最佳效果，使用人員必須了解和掌握顯微鏡正確的調試方法和使用方法。尤其在新一代顯微鏡中，具備了多種功能，能進行多種顯微鏡檢方法觀察，正確的試調方法和使用方法就顯得尤為(wei) 重要。下麵以Axioplan萬(wan) 能研究顯微鏡為(wei) 例，簡述調試及使用方法。

　　1. 顯微鏡照明光路係統的調整　為(wei) 了使顯微鏡的視野能受到均勻而又充分的照明，在顯微鏡初次安裝和調試時，就必須把照明光路係統調整好，這是正確使用顯微鏡，並獲得正確、可靠結果的重要手段和最基本的要求。此外，正確掌握照明光路係統的調整，是使用顯微鏡過程中更換光源燈泡後所必經的步驟，也是在日常使用過程中不時地檢驗顯微鏡性能的必要手段。顯微鏡照明光路係統的調整主要有以下4項內(nei) 容：

 　　(1) 照明光源燈室在顯微外的初步調整

　　① 首先將燈室的外殼打開，壓彈簧夾子將鹵素燈泡裝入插座中，安裝時避免手指直接接觸燈泡（可用柔軟的布或紙隔住），以免燈泡上留有指紋等髒物，影響燈泡的使用壽命。

　　② 把燈室擺在桌麵上，接通電源後，用專(zhuan) 用的螺絲(si) 刀調節燈的調焦旋鈕孔（標有“←→”），使燈絲(si) 投影在1-2m外的牆上，將燈絲(si) 成像調至清晰；然後調節燈的高低位置調節絲(si) 孔（標有“──”），使燈絲(si) 位置高低適當；再調節燈的左右位置調節螺絲(si) 孔（標有“──”），使燈絲(si) 左右位置合適。

　　(2) 光源發光體(ti) （燈絲(si) ）在顯微鏡內(nei) 位置的檢驗和校正　目的是為(wei) 了把發光體(ti) 的像端端正正地調入物鏡的視域範圍內(nei) ，從(cong) 光源的角度去確保顯微鏡的視域受到充分而均勻的照明，這是調整庫勒照明係統的前提條件。

　　需要的基本工具：對中望遠鏡購置顯微鏡時已配備。

 　　① 拔掉燈庫內(nei) 的毛玻璃套筒，把燈室裝回顯微鏡上；

　　② 選用10×物鏡，開亮光源程序找樣品並調焦清晰，再換用40×物鏡把樣品調焦清晰（40×物鏡可以看清燈絲(si) 的全貌）；

　　③ 把聚光鏡的孔徑光闌和視場光闌均開到最大；

　　④ 拔掉其中一個(ge) 目鏡，換上對中望遠鏡，抓住白色部分，另一手伸縮黑色接目鏡，就可在視野中看到燈絲(si) 像；

　　⑤ 如燈絲(si) 位置不合適，調“──”孔，把燈絲(si) 像沿水平方向調好，調“──”孔，把絲(si) 像沿垂直方向調好，直至將燈絲(si) 像調至剛好充滿物鏡孔徑的光圓像；

　　⑥ 調整完畢後，將毛玻璃套筒插回原位，拔掉對中望遠鏡，換回目鏡作下一步調整。

　　以上所述照明光源燈室在顯微鏡外的調整和光源發光體(ti) 在顯微鏡內(nei) 位置的校驗，隻需在顯微鏡初次安裝調試及更換燈泡時進行，平時使用顯微鏡時不能隨意亂(luan) 調亂(luan) 動。萬(wan) 一調亂(luan) 時，可按上述步驟調回原狀。#p#分頁標題#e#

　　(3) 庫勒照明（Kohler）係統的正確調整　顯微鏡的正確調試，主要工作之一是照明光路係統的調整，而其中的關(guan) 鍵是庫勒照明係統的調整。對於(yu) 每一位使用顯微鏡的人員，特別是作顯微照像的人員來說，應該對庫勒照明係統的原理及其調整步驟有一定的了解和掌握，才能充分發揮顯微鏡應有的功能，拍出來的照片才能在效果上比較一致而又完善。

　　庫勒照明係統的原理簡單來說就是：光源發光體(ti) 上任意一點發出的光，可以照明顯微鏡的視域範圍，而光源發光體(ti) 上每一點所發出的光匯集起來，在顯微鏡的視域中就實現了非常充分而又均勻的照明。

　　調整庫勒照明係統的目的，是為(wei) 了使所觀察的視域能獲得均勻而又充分的照明，防止雜散光對照像係統造成影響或幹擾，以免照像時在底片形成灰霧。

　　高調整庫勒照明係統的必要部件：視場光闌、可進行合軸調整的聚光鏡係統。

　　① 選用10×物鏡和10×目鏡；

　　② 把聚光鏡前端透鏡擺進光路中，孔徑光闌調至適中的位置上（不大不小），再把聚光鏡升到最頂的位置上，聚光鏡轉盤調至明視野“J”位置；

　　③ 把視場光闌調至最小（0.1）；

　　④ 載物台上放上已封片的生物樣品，開亮光源，調焦清晰；

　　⑤ 視域中會(hui) 出現一個(ge) 局部照明的區域或亮斑，這是視場光闌的模糊像，在其中可以清晰地看到樣品的細節；在它之外是較暗的視域，不一定能把樣品的細節看得清楚；

　　⑥ 把聚光鏡微微地向下調，使視野中的亮斑逐漸收小，慢慢變成一個(ge) 清晰的多邊形象，這便是視場光闌的清晰像；

　　⑦ 一般情況下，多邊形象並不在視域中央，需要調整聚光鏡的一對調中螺絲(si) ，把視場光闌多邊形的像調至中央位置；

　　⑧ 逐漸開大視場光闌，使多邊形象成為(wei) 視域的內(nei) 接多邊形，進一步核對調中的狀況，如對中不夠理想，繼續微微調對中螺絲(si) ；

　　⑨ 將視場光闌稍為(wei) 再微微開大一些，使它的多邊形象恰好消失在視域的邊緣上，至此，庫勒照明係統調整完畢。

　　庫勒照明係統調整好以後，整個(ge) 視域照明均勻，拍攝的顯微照片明亮清晰，反差正常。在日後使用過程中應特別注意：

　　a. 視場光闌不可任意開大，但可隨物鏡倍數的增大而將視場光闌收小，隨物鏡倍數的減小而開大；

　　b. 聚光鏡的高低位置不準亂(luan) 調，否則會(hui) 破壞已調整好的庫勒照明係統；#p#分頁標題#e#

 　　c. 使用10×以下物鏡時要將聚光鏡前端透鏡擺出光路外，使用10×或10×以上物鏡時要將前端透鏡擺入光路中；

　　d. 關(guan) 於(yu) 物鏡倍數與(yu) 視場光闌大小配合問題，在實際使用過程中，作為(wei) 一般觀察不一定要收小或開大視場光闌，但作顯微照相時，為(wei) 了避免雜散光線對照相係統的幹擾，以便能拍攝到較完善的照片，則應在使用每一個(ge) 倍數的物鏡時，把視場光闌調節到正好消失於(yu) 所觀察的視域邊上，這是比較繁複的工作，但又非做不可。較為(wei) 簡便的方法是把與(yu) 各個(ge) 倍數物鏡相對應的視場光闌事先調整好，並作好記號，以後使用時根據記號直接調至相應的位置。

       (4) 孔徑光闌的正確使用　由於(yu) 聚光鏡的孔徑光闌可以影響顯微鏡的分辨率，使用時應掌握正確的使用方法。過去由於(yu) 對孔徑光闌的認識不足，往往把它當作是調節視野亮度的工具。雖然調節孔徑光闌在一定程度上可以改變視野的亮度，但會(hui) 直接影響成像的反差、對比度及分辨率，在使用過程中應盡可能避免。

　　為(wei) 了發揮聚光鏡孔徑光闌的作用，以便在觀察時，尤其在作顯微照相時獲得最佳分辨率，在每換用一個(ge) 倍數的物鏡時，在樣品調焦清晰後，需要調節孔徑光闌，使它的大小正好等於(yu) 所用物鏡數值孔徑（物鏡孔徑像）的2/3 。

　　調整方法是用對中望遠鏡對焦於(yu) 視野中黑色相差環上，調節孔徑光闌，可以看到一個(ge) 多邊形的孔徑光闌像，然後調到等於(yu) 物鏡孔徑像的2/3，即介於(yu) 黑色相差環外與(yu) 圓形視域內(nei) 之間。為(wei) 方便起見，可把與(yu) 各倍數物鏡相對應的孔徑光闌預先調整好，並作好標記，以免每次使用都要重新調整。