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STED超分辨率光學顯微成像已實現

星之球激光 來源:科學網2012-07-03 我要評論(0 )   

近日,北京大學工學院生物醫學工程係席鵬小組實現了STED超分辨率光學顯微成像,並用這一新型顯微技術實現了對細胞內(nei) 三大細胞骨架的成像。相關(guan) 論文發表在美國《公共科學...

 

近日,北京大學工學院生物醫學工程係席鵬小組實現了STED超分辨率光學顯微成像,並用這一新型顯微技術實現了對細胞內(nei) 三大細胞骨架的成像。相關(guan) 論文發表在美國《公共科學圖書(shu) 館—綜合》(PLoS ONE)。

 

傳(chuan) 統的顯微技術受到衍射極限的限製,使得生物學家無法觀測到水平方向低於(yu) 200nm的細胞器結構。在最近的十年內(nei) ,一係列的超分辨顯微技術被發明出來,包括德國馬普生物物理化學研究所的Stefan Hell教授發明的受激輻射光淬滅(STED)技術,和霍華德休斯醫學研究所(HHMI)的Eric Betzig、莊小威教授等人發明的隨機光學定位重構顯微(PALM/STORM)技術,以及同在HHMI的Mats Gustaffson教授發明的飽和結構光學顯微技術。其中,由於(yu) STED直接在物理學家熟悉的點擴展函數上進行調製,因此能夠實現更快的成像速度,且不特別依賴於(yu) 熒光染料,因此備受關(guan) 注。

 

伴隨其優(you) 勢的是,STED需要在納米量級的精度上將兩(liang) 束光的點擴展函數進行配準,因此相比其他方法的工程難度較大。雖然現在Leica已經有STED超分辨顯微商用係統,然而其價(jia) 格高昂,使得一般實驗室難以配備。同時,在國際上以及我國國內(nei) ,有一批研究者曾經致力於(yu) 雙光子研究,而雙光子過程所需的鈦寶石激光器能夠滿足STED超分辨率顯微的需要。基於(yu) 這一點,席鵬課題組在一台6W泵浦的鈦寶石激光器上,通過連續光調諧,實現了60nm的顯微分辨率,這一分辨率僅(jin) 為(wei) 入射光波長的十分之一。這一工作也是我國科技工作者首次在實驗上實現了STED超分辨的標誌。

 

這一研究將為(wei) 眾(zhong) 多的科技工作者在利用現有鈦寶石激光器搭建超分辨率顯微係統方麵提供指引,並拓展STED超分辨顯微技術在生物亞(ya) 細胞成像中的應用。

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