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激光檢測

高效液相色譜儀常用檢測器的種類及分析

星之球激光 來源:慧聰網2011-11-21 我要評論(0 )   

檢測器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉化為(wei) 可供檢測的信號,常用檢測器有紫外吸收、熒光、示差折光、化學發光等。 1.紫外可見吸收檢測器(ultraviolet-visi...

檢測器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉化為(wei) 可供檢測的信號,常用檢測器有紫外吸收、熒光、示差折光、化學發光等。

     1.紫外可見吸收檢測器(ultraviolet-visibledetector,UVD)

     紫外可見吸收檢測器(UVD)是HPLC中應用最廣泛的檢測器之一,幾乎所有的液相色譜儀(yi) 都配有這種檢測器。其特點是靈敏度較高,線性範圍寬,噪聲低,適用於(yu) 梯度洗脫,對強吸收物質檢測限可達1ng,檢測後不破壞樣品,可用於(yu) 製備,並能與(yu) 任何檢測器串聯使用。紫外可見檢測器的工作原理與(yu) 結構同一般分光光度計相似,實際上就是裝有流動地的紫外可見光度計。

     (1)紫外吸收檢測器

     紫外吸收檢測器常用氘燈作光源,氘燈則發射出紫外-可見區範圍的連續波長,並安裝一個(ge) 光柵型單色器,其波長選擇範圍寬(190nm~800nm)。它有兩(liang) 個(ge) 流通池,一個(ge) 作參比,一個(ge) 作測量用,光源發出的紫外光照射到流通池上,若兩(liang) 流通池都通過純的均勻溶劑,則它們(men) 在紫外波長下幾乎無吸收,光電管上接受到的輻射強度相等,無信號輸出。當組分進入測量池時,吸收一定的紫外光,使兩(liang) 光電管接受到的輻射強度不等,這時有信號輸出,輸出信號大小與(yu) 組分濃度有關(guan) 。

     局限:流動相的選擇受到一定限製,即具有一定紫外吸收的溶劑不能做流動相,每種溶劑都有截止波長,當小於(yu) 該截止波長的紫外光通過溶劑時,溶劑的透光率降至10%以下,因此,紫外吸收檢測器的工作波長不能小於(yu) 溶劑的截止波長。

     (2)光電二極管陣列檢測器(photodiodearraydetector,PDAD)

     也稱快速掃描紫外可見分光檢測器,是一種新型的光吸收式檢測器。它采用光電二極管陣列作為(wei) 檢測元件,構成多通道並行工作,同時檢測由光柵分光,再入射到陣列式接收器上的全部波長的光信號,然後對二極管陣列快速掃描采集數據,得到吸收值(A)是保留時間(tR)和波長(l)函數的三維色譜光譜圖。由此可及時觀察與(yu) 每一組分的色譜圖相應的光譜數據,從(cong) 而迅速決(jue) 定具有最佳選擇性和靈敏度的波長。

     單光束二極管陣列檢測器,光源發出的光先通過檢測池,透射光由全息光柵色散成多色光,射到陣列元件上,使所有波長的光在接收器上同時被檢測。陣列式接收器上的光信號用電子學的方法快速掃描提取出來,每幅圖象僅(jin) 需要10ms,遠遠超過色譜流出峰的速度,因此可隨峰掃描。

     2.熒光檢測器(fluorescencedetector,FD)

     熒光檢測器是一種高靈敏度、有選擇性的檢測器,可檢測能產(chan) 生熒光的化合物。某些不發熒光的物質可通過化學衍生化生成熒光衍生物,再進行熒光檢測。其最小檢測濃度可達0.1ng/ml,適用於(yu) 痕量分析;一般情況下熒光檢測器的靈敏度比紫外檢測器約高2個(ge) 數量級,但其線性範圍不如紫外檢測器寬。近年來,采用激光作為(wei) 熒光檢測器的光源而產(chan) 生的激光誘導熒光檢測器極大地增強了熒光檢測的信噪比,因而具有很高的靈敏度,在痕量和超痕量分析中得到廣泛應用。

3.示差折光檢測器(differentialrefractiveIndexdetector,RID)

     示差折光檢測器是一種濃度型通用檢測器,對所有溶質都有響應,某些不能用選擇性檢測器檢測的組分,如高分子化合物、糖類、脂肪烷烴等,可用示差檢測器檢測。示差檢測器是基於(yu) 連續測定樣品流路和參比流路之間折射率的變化來測定樣品含量的。光從(cong) 一種介質進入另一種介質時,由於(yu) 兩(liang) 種物質的折射率不同就會(hui) 產(chan) 生折射。隻要樣品組分與(yu) 流動相的折光指數不同,就可被檢測,二者相差愈大,靈敏度愈高,在一定濃度範圍內(nei) 檢測器的輸出與(yu) 溶質濃度成正比。

     4.電化學檢測器(elec)chemicaldetector,ED)

     電化學檢測器主要有安培、極譜、庫侖(lun) 、電位、電導等檢測器,屬選擇性檢測器,可檢測具有電活性的化合物。目前它已在各種無機和有機陰陽離子、生物組織和體(ti) 液的代謝物、食品添加劑、環境汙染物、生化製品、農(nong) 藥及醫藥等的測定中獲得了廣泛的應用。其中,電導檢測器在離子色譜中應用最多。

     電化學檢測器的優(you) 點是:

     ①靈敏度高,最小檢測量~般為(wei) ng級,有目可達pg級;

     ②選擇性好,可測定大量非電活性物質中極痕量的電活性物質;

     ③線性範圍寬,一般為(wei) 4~5個(ge) 數量級;

     ④設備簡單,成本較低;

     ⑤易於(yu) 自動操作。

     5.化學發光檢測器(c。iluminescencedetector,CD)

     化學發光檢測器是近年來發展起來的一種快速、靈敏的新型檢測器,因其設備簡單、價(jia) 廉、線性範圍寬等優(you) 點。其原理是基於(yu) 某些物質在常溫下進行化學反應,生成處於(yu) 激發態勢反應中間體(ti) 或反應產(chan) 物,當它們(men) 從(cong) 激發態返回基態時,就發射出光子。由於(yu) 物質激發態的能量是來自化學反應,故叫作化學發光。當分離組分從(cong) 色譜柱中洗脫出來後,立即與(yu) 適當的化學發光試劑混合,引起化學反應,導致發光物質產(chan) 生輻射,其光強度與(yu) 該物質的濃度成正比。

     這種檢測器不需要光源,也不需要複雜的光學係統,隻要有恒流泵,將化學發光試劑以一定的流速泵入混合器中,使之與(yu) 柱流出物迅速而又均勻地混合產(chan) 生化學發光,通過光電倍增管將光信號變成電信號,就可進行檢測。這種檢測器的最小檢出量可達10-12g。

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